DWD-1 UV detektörü (yüksek performanslı çift ışın çift dalga boyu) yerleşik veri işleme

Dalga uzunluğu aralığı: 254nm, 280nm (aynı anda tespit), 254nm, 280nm-400nm spektrum hattı arasında isteğe bağlı iki dalga uzunluğu aynı anda tespit edilir.

* DWD-1 alet özellikleri

Protein 280nm/254nm Çift Dalga Uzunluğu:

Protein moleküllerinde çift bağlı tiresin, tranin gibi aromatik amino asitler bulunmaktadır. UV ışığını emiş özelliklerine sahiptir, 280nm dalga uzunluğunda emiş zirvesi var ve bu dalga uzunluğunda emiş zirvesinin optik yoğunluk değeri konsantrasyonlarıyla olumlu orantılıdır, bu nedenle protein kalitasyonu ve miktarlı ölçümü için bir temel olarak kullanılabilir, bu nedenle, 280nm UV emiş yöntemi genellikle polimerik sistemdeki protein konsantrasyonlarının sürekli izlenmesi için kullanılır. Ancak çeşitli proteinlerin tirosin ve tranin içeriği farklı olduğundan, doğru miktarda ölçülmek için, ölçülecek proteinin saf ürünününün standart olarak karşılaştırılması veya referans olarak ışık tükenmesi faktörünün zaten bilinmesi gerekir. Ayrıca, pek çok protein olmayan madde 280nm dalga boyunda da belirli bir emim kapasitesine sahiptir ve müdahale olabilir. Özellikle nükleyasit (purin ve pirimidin) etkileri daha ciddi. 280nm'de emilme proteinden 10 kat daha güçlüdür (gram başına), ancak nükleyasit, 254nm'de daha güçlüdür ve 254nm'ye yakın bir emiş zirvesi vardır. Nükleyik asit 254nm'de 280nm'deki ışık kayıp faktörünün iki katıdır.

Proteinlerin aksine, 280nm UV emim değeri 254nm'den daha büyük.

Genellikle.：

Saf proteinin ışık emici oranı: A280/A254” 1.8

Saf nükleer asit ışık emim oranı: A280/A254

Bu nedenle, protein çözümünde aynı anda nükleyasit bulunduğunda (çoğu biyolojik sistem için), OD254nm ve OD280nm'nin aynı anda ölçülmesi gerekir. Daha sonra, iki dalga uzunluğunun emilme oranına göre, nükleyasit etkisini ortadan kaldırmak için deneyimsel bir formül yoluyla düzeltilen protein gerçek miktarı hesaplanır.

Protein konsantrasyonu: 1.45 x A280 – 0.74 x A254 (mg/ml)

Bu deneyimsel formül, bilinen farklı konsantrasyon oranlarındaki bir dizi protein (maya enolaz) ve nükleyasit (maya nükleyasit) karışımının ölçüldüğü verilerle oluşturulmuştur.